Estudo de ORC1/CDC6 de Trypanosoma cruzi (2023)
- Authors:
- Autor USP: PEREIRA, MURILO LEÃO - IFSC
- Unidade: IFSC
- Sigla do Departamento: FCI
- DOI: 10.11606/D.76.2023.tde-08082023-112546
- Subjects: TRYPANOSOMA CRUZI; DOENÇA DE CHAGAS; DNA; REPLICAÇÃO DO DNA
- Keywords: Chagas disease; Complexo pré-replicação; Pre-replication complex; Replicação; Replication
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: A replicação do material genético é essencial para a manutenção e propagação da vida. No caso do DNA em eucariotos, esse processo se inicia pelo Complexo Pré- Replicação (pre-RC). Para sua formação, ocorre o reconhecimento de Origens de Replicação (ORIs) no genoma pelo ORC1-6, seguido da ligação aos fatores de licenciamento CDC6 e CDT1 e recrutamento da helicase MCM2-7. O parasita responsável pela doença de Chagas Trypanosoma cruzi apresenta apenas ORC1 do hexâmero de reconhecimento de ORI e essa proteína é intimamente relacionada em sequência a CDC6. A predição da estrutura de TcORC1/CDC6 por diferentes métodos computacionais, seu estudo filogenético em protozoários e preliminar ensaios biofísicos foram o foco do trabalho. Os modelos estruturais gerados por I-TASSER, Robbeta, AlphaFold2 e homologia compartilharam grande similaridade principalmente no provável sítio ativo da proteína, e a comparação dos modelos indicou AlphaFold2 como o método com melhor predição. Consultas comparativas de estruturas proteicas evidenciaram a qualidade da predição. As análises filogenéticas traçaram um histórico evolutivo para a proteína e apontaram em nível molecular divisões que são biologicamente válidas. Os experimentos de expressão e purificação da proteína apresentaram dificuldade em manter a sua estabilidade. Por fim, a identificação de TcORC1/CDC6 pelo anticorpo anti-ORC1 apontou incorretamente a Proteína de Ligação à Maltose (MBP), e isso culminou na caracterização biofísica ter sidorealizada com uma molécula diferente da de interesse. Os resultados abrem caminho para uma futura caracterização biofísica e estrutural de TcORC1/CDC6 e para o melhor entendimento da via de replicação no parasita
- Imprenta:
- Publisher place: São Carlos
- Date published: 2023
- Data da defesa: 23.05.2023
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
- URL de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc-sa
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ABNT
PEREIRA, Murilo Leão. Estudo de ORC1/CDC6 de Trypanosoma cruzi. 2023. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Carlos, 2023. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-08082023-112546/. Acesso em: 11 jun. 2024. -
APA
Pereira, M. L. (2023). Estudo de ORC1/CDC6 de Trypanosoma cruzi (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-08082023-112546/ -
NLM
Pereira ML. Estudo de ORC1/CDC6 de Trypanosoma cruzi [Internet]. 2023 ;[citado 2024 jun. 11 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-08082023-112546/ -
Vancouver
Pereira ML. Estudo de ORC1/CDC6 de Trypanosoma cruzi [Internet]. 2023 ;[citado 2024 jun. 11 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-08082023-112546/ - Caracterização biofísica de ORC1/CDC6 e Pol de Trypanosoma cruzi
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Informações sobre o DOI: 10.11606/D.76.2023.tde-08082023-112546 (Fonte: oaDOI API)
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